抗体亚型鉴定
亚型指的是相同的构成方式，但是空间结构不同的蛋白质结构。抗体亚型，指的是在机体内产生的“Y”构型的免 疫球蛋白（Ig），基于小分子多肽结构上的差异，可以进一步的进行细分。
抗体亚型
重链
抗体以一个或者多个“Y”字形单体存在,每个“Y”字形单体由 4 条多肽链组成,包含两条相同的重链和两条相同的轻链。 通常，抗体的种类由重链决定。例如哺乳动物 Ig 的重链一共有五种,分别用希腊字母α、δ、ε、γ和 μ 来命名,相对应组成的抗体就称为 IgA、IgD、IgE、IgG 和 IgM。其中，人的γ可以进一步细分为γ1、γ2、γ3、γ4 等亚类，分别对应 IgG1, IgG2, IgG3 和 IgG4 四个亚型，小鼠γ可以进一步细分为γ1、γ2a、γ2b、γ3 等亚类，分别对应 IgG1, IgG2a, IgG2b 和 IgG3 四个亚型。
轻链
哺乳动物有两种轻链：λ型和κ型。出于科研的需要，人们也会对轻链的亚型进行鉴定。
类/亚类 | 重链 | 轻链 | 分子量（kDa） | 结构 | 功能 |
IgA1
| α1α2
| λ或κ | 150-600 | 单体-四聚体
| IgA 有血清型和分泌型，血清型 IgA 不显示重要的免疫功能，分泌型 IgA 存在于分泌液中，如唾液、泪液、初乳、鼻和支气管分泌液等，是机体粘膜局部抗感染免疫的主要抗体。 功能不详； |
IgD | δ | λ或κ | 150 | 单体 | 与 IgM 共同存在于 B 细胞发育的各个阶段；大部分与 B 细胞结合。 |
IgE | ε | λ或κ | 190 | 单体 | 结合变应原引发巨细胞释放组胺，可以对抗寄生虫感染。 |
IgG1 IgG2 IgG3 IgG4 | γ1 γ2 λ γ3 γ4 | λ或κ | 150 | 单体 | 血清中最主要的免疫球蛋白。在免疫反应中最主要的抵 御病原的侵袭的抗体为 IgG; 可通过胎盘。 |
IgM | μ | λ或κ | 900 | 五聚体 | 最早产生的反应性抗体，在 B 细胞表面表达，分泌型有很高的亲和力。在 B 细胞介导的免疫反应早期，产生足够的 IgG 之前发挥消除病原菌的作用。 |
表 1：不同亚型抗体的结构与功能
抗体亚型鉴定
抗体亚型鉴定的原理是利用酶联免疫吸附实验（ELISA），测定待测抗体与不同亚 型特异性的抗体的结合情况，找出可以与待测抗体特异性结合的抗体，由于与待测抗体结合的抗体的特异性都是已知的，依据结合抗体的特异性可以得出待测抗体的亚型。以小鼠抗体亚型的测定为例，利用 ELISA 测定待测抗体与针对小鼠 IgG1、IgG2A、 IgG2B、 IgG3、IgM、λ、κ有特异性的抗体的结合情况。如果待测抗体抗体可以与针对小鼠 IgG1 的特异性抗体结合（通过肉眼观察颜色深浅或通过测OD 值判断），则该抗体的亚型为 IgG1。以此类推，也可以测出轻链的亚型。
鉴定方法
目前比较常用的方法是利用试剂盒进行抗体亚型的鉴定，按照试剂盒说明书进行操作，便可以直观的读出抗体的亚 型。
利用试剂盒鉴定抗体亚型常见问题与解决方法：
样本中抗体浓度过高再将样本 1:2-1:10 稀释
常见问题 | 可能原因 | 解决方案 |
多种重链结果 | 腹水中有杂抗体 杂交瘤细胞中含有多种细胞系 | 将腹水样本至少 1:100000 稀释 |
结果难以判定 | 多种重链或轻链结果 | 再将样本 1:4 或 1:8 稀释后重新检测 |
显色较慢或颜色较弱 | 样本中抗体浓度低 | 减少稀释倍数；延长显色时间 |
表 2：常见问题与解决方案
抗体亚型鉴定的意义
不同亚型的抗体在结构上有所区别，其免疫源性与在体内发挥的作用存在差异，对抗体进行进一步的细分，并进行 抗体亚型鉴定，对于疾病作用机理的研究、抗体药物的开发有重要意义。
相关服务
抗体亚型鉴定服务:IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3，IgM，IgA 的鉴定。
