流式细胞电转仪

转染是分子生物学中最常用的技术之一，也适用于基因治疗的研究。基因治疗中蛋白质最大的功能和挑战之一是为基因产物提供可靠的单特异性检测试剂，尤其是抗体。因此，基于目标靶蛋白的表达以及核酸质粒的摄取，优化转染效率尤为重要。过去，瞬时转染系统大多用于生产天然复合蛋白，这得益于高效转染方案和悬浮细胞系在高水平生长的可用性密度。对于瞬时表达 ，主要应用HEK-293和CHO-K1细胞系，这两种细胞系均可适应悬浮培养 ，并且可获得亚克隆 。

相对于稳定转染，瞬时转染具有一个很大的优势：速度。在稳定转染需要数周或数月的情况下，瞬时转染在数天内完成，从而快速、可靠地获得少量蛋白质来用于实验。

我们发现了一种简单，快速和稳健的流式电转仪瞬转法，可用作优化转染效率的工具，实现瞬时表达的最佳途径，耗时短、成本低、效率高，在蛋白药物候选基因的构建和筛选及抗体蛋白的小批量生产中具有很大的优势。这种流式电极技术在较低的电压下即能产生足够强度的均匀电场，可实现90%以上的转染效率和细胞存活率，而且合理的设备及耗材成本也具有显著的优势。

X-Porator F1 瞬转体系介绍

流式电转仪 X-Porator F1，在使用 CHO-S、293F 等细胞系反复实验验证后，形成了一套基于 ExpiCHO-S细胞的高表达电转体系，为用户提供了一套稳定、高效的整体方案（包含国产培养体系）。目前，X-Porator F1瞬转体系实现了克级蛋白表达量，将多家客户瞬转表达量较化转提高了数倍至数十倍。

1、工作流程

▲X-Porator F1专用耗材安装图

▪  将前一步细胞离心的离心管作为上样容器，加入质粒和电转缓冲液；
▪  将离心管与 F1 一次性耗材对接，并将全封闭耗材装配到 F1 设备上；
▪  通过蠕动泵驱动细胞悬液，细胞经过电极芯片，在流动状态下完成电转染并被后端离心管收集；
▪  取出细胞液直接稀释培养。

2、产品特点

▲X-Porator F1设备和专用耗材包

▪  单次可电转 1L 培养量的细胞；
▪  高达 90%以上转染效率和细胞存活率；
▪  较化转蛋白表达时间更短；
▪  符合 GMP 标准的耗材；
▪  X-Porator F1 设备参数可调整；
▪  X-Porator F1 电转适用于细胞原厂培养基的方案，也有国产培养基的替代方案；
▪ 与其它类似电转染设备比较，X-Porator F1 瞬转体系具有显著的成本优势。

结果节选

▲实测结果数据节选