LSPR分子互作技术

今天给大家推荐的是研锦家核心技术——LSPR分子互作技术：LSPR局域等离子共振技术是以纳米金颗粒为检测单位的新一代SPR技术。LSPR一系列的技术优势使得该项技术有望成为生命科学研究实验必备的技术平台支撑。

01 LSPR局域等离子共振技术优势

不同于传统SPR技术检测折射率改变引起的SPR角度的偏转，LSPR检测的是纳米金颗粒表面分子层厚度的变化产生的光吸收峰的位移。

由于光波长的变化受环境影响小，对体积、温度、缓冲液折射率等变化干扰不敏感，因此该系列产品的检测结果在保证了与传统SPR技术相近的精确度和灵敏度的同时，采用更为简易的光路系统及操作过程，极大地降低了SPR技术的实验门槛，可再生的芯片同时降低了后期使用的各项成本 。

此一系列的优势使得LSPR技术有望成为生命科学研究实验必备的技术平台支撑。

02分子互作平台应用领域

免疫学应用

可用于鉴定蛋白类药物体内抗体产生、早期心机梗塞心型脂肪酸束缚蛋白质（H-FABP）癌症病人体液、组织液成分快速分析、以建立临床分析数据库，快速确定癌症标志物与疾病或机体功能相互的蛋白、核酸、脂类等相互作用检测。

抗体检测 

  ◆ 抗体活性鉴定

  ◆ 高通量筛选：抗体库，抗体药物筛选

  ◆ 表达蛋白相互作用

  ◆ 提取蛋白相互作用 

  ◆ 粗提抗体偶联检测和相关的定量 

  ◆ 抗体质量控制 

  ◆ 抗体药物开发

蛋白研究

  ◆ 通过OpenSPR检测蛋白间的相互作用以确定机动性

  ◆ 检测Kon、Koff,和Kd值（亲和性） 

  ◆ 不同发育阶段蛋白数量水平

  ◆ 不同表达水平的蛋白数量水平 

  ◆ 蛋白偶联或非偶联 

  ◆ 蛋白/抗体是否存在

  ◆ 粗提抗体滴度水平

  ◆ 配体偶联配对筛选

  ◆ 蛋白相互作用特异性分析

药理学检测

  ◆ 药物发现-- 头孢他啶小分子蛋白相互作用动力学分析

  ◆ 小分子开发 

  ◆ 表达蛋白相互作用 

  ◆ 分离或提取蛋白的相互作用

  ◆ 筛选配体偶联 O头孢他啶等小分子研究

其他应用

  ◆ 生物传感器开发和优化 

  ◆ 纳米材料合成评估及质量控制 

  ◆ 纳米材料特性检测 

  ◆ 探测定位表面等离子共振 

  ◆ 开发潜在的物理性等离子体 

  ◆ 比色感应检测 

  ◆ 教学应用

碳水化合物结合动力学

◆ 检测Kon、Koff,和Kd值（亲和性） ◆ 碳水化合物水平◆ 分子偶联与否 ◆ 碳水化合物存在检测 ◆ 分子相互作用特异性检测

核酸、配体分析

  ◆ 核酸与蛋白相互作用

  ◆ 核酸与配体相互作用

  ◆ 配体质量控制 

  ◆ 药物发现

  ◆ 粗提裂解物偶联水平和相对定量

  ◆ 治疗和诊断应用

脂质体研究

  ◆ 表达蛋白质的相互作用 

  ◆ 提取蛋白质的相互作用

  ◆ 膜蛋白 

  ◆ 脂质链 

  ◆ 囊泡与脂质影响

LSPR在应用中发表的文献：

1. Comparison of Two Docking Methods for Peptide-Protein Interactions. (Journal of the Science of Food and Agriculture .09 Jan 2018) LSPR在蛋白与多肽研究中应用

2. Ameliorating mitochondrial dysfunction restores carbon ion-induced cognitive deficits via co-activation of NRF2 and PINK1 signaling pathway (Redox Biolog, July 2018, Pages 143-157) LSPR在CO-IP中应用

3. Targeted Delivery to Tumor-associated Pericytes via an Affibody with High Affinity for PDGFRp Enhances the in vivo Antitumor Effects of Human TRAIL (Theranostics 2017; 7(8):2261-2276.doi:10.7150/thno.l9091) LSPR在抗体药物研发中应用

4. Crosstalk between p38 MAPK and caspase-9 regulates mitochondria-mediated apoptosis induced by tetra-a-(4-carboxyphenoxy) phthalocyanine zinc photodynamic therapy in LoVo cells. (Oncology Reports 39(1) November 2017 DOI:10.3892/or.2017.6071) LSPR在抗肿瘤药物与信号通路研究中应用

5. Structural Studies of a Complex Between Endothelial Nitric Oxide Synthase and Calmodulin at Physiological Calcium Concentration. (Biochemistry 55(42):5962-5971 .October 2016 DOI:10.1021/acs.biochem.6b00821) LSPR在蛋白结构与功能研 究中应用

6. Study on neuroprotective effect of schisandrin B by regulating the A口 and its downstream NF-kB/TNF-apathway. LSPR在药 物作用机理研究中应用

7. The structure, kinetics and interactions of the p-carboxysomal p-carbonic anhydrase, CcaA.(《Biochemical Journal》, 2016,473 (24) LSPR在蛋白作用位点研究中应用

8. Stable ligand-free stellated polyhedral gold nanoparticles for sensitive plasmonic detection R. Keunen, D. Macoreetta, N. Cathcart, and V. Kitaev, Nanoscale

9. Gold-plated silver nanoparticles engineered for sensitive plasmonic detection amplified by morphological changesK. Hobbs, N. Cathcart, and V. Kitaev, Chemical Communications.

10. Investigating binding kinetics of RNA aptamers via the Open SPR system (Poster). V. La, T. Dieckmann, Rustbelt RNA Meeting Sandusky, United States

11. Dynamics of Calmodulin's Interaction with Nitric Oxide Synthase at Physiological Calcium Concentrations (Presentation).M. Piazza and G. Guillemette, Laurier Protein Science Symposium, Waterloo, Canada.

03与传统SPR媲美的实验结果精度

用OpenSPR，Biacore，Biacore三款仪器分别对相同的配体M1，M2做检测，分析结果显示，三款仪器具有可比的相似的信噪比。

从结果上我们可以看到，与全球生物感应器分子亲和性标准研究结果对比，其通过150个客户分析同样的蛋白与抗体相互作用的KD值，最终的KD结果为0.62nm＋/－0.98nm，因此，表明这三款仪器的结果在误差上是一致的，这个误差在实验中因仪器、条件及使用者不同是可预估的，因此也证明了OpenSPR相对其它系统更可靠。

04 LSPR分子互作平台核心竞争优势

●  满足不同实验需求：10种芯片，针对不同配体与分析体的相互作用检测，包括空白纳米金、COOH、NH2、NTA、Streptavidin、Biotin

●  抗干扰能力强：检测不受温度、缓冲液折射率等外界环境影响

●  功能强大：可用于蛋白、核酸、脂类、多肽等大小分子相互作用分析

●  应用领域广泛：生化、药物开发、肿瘤研究，免疫学研究、抗体工程等

05 LSPR分子互作案例分享

案例1. PDGEFβ在肿瘤组织外膜细胞高表达，ZPDGFR β affibody亲和体能介导与hTRAIL 与PDGEFβ作用

为了确定PDGEFβ 与Z PDGFR β affibody关系，利用LPSR 技术检测了两者相互作用，发现他们之前存在很高的亲和力，从而证明了hTRAIL 与PDGFRβ作用依赖于Z PDGFR β亲合体，并且在小动物活体上也做了验证，此实验是我们花了一天时间给老师做DEMO 得出的数据，便帮老师发了一个高影响因子的文献，足以证明我们Nicoya OpenSPR 分子互作分析仪检测的准确性及高效性。

案例2.大肠癌LoVo细胞中脂鲤α（羧苯氧基)酞菁锌光动力学治疗诱导的p38 MAPK / caspase-9调节线粒体调节的凋亡 的相互作用

为了证实脂鲤α（羧苯氧基)酞菁锌处理的细胞中p38 MAPK / caspase-9相互作用增强，利用LSPR 的在线IP检测方法，将抗体固定到芯片上，裂解液过芯片，发现处理组信号明显高于对照组信号，同时用传统IP方法做了验证，结果一致。

LSPR检测方法具有快速简单；灵敏度高等特点，将传统2-3天的实验缩短到35min左右。

案例3.揭示五味子素保护神经元受损的详细机制

五味子乙素Sch B能够靶向亲和Aβ配体，找到了信号通路的起源点，之后通过一系列方法反向， Sch B促进Aβ寡聚体的解聚，减少磷酸化Tau蛋白的含量，下调下游NF-κB/TNF-α信号通路的表达，抑制神经元线粒体凋亡，减轻Aβ诱导的神经炎性反应和神经毒性，保护受损神经元，从而详细的解析五味子素保护神经元受损的详细机制。